三泰科技（常州）有限公司

在药物研发过程中，对药物中的杂质含量控制是药物质量控制的关键，而对杂质控制的核心是对药物中每一个杂质的活性逐一制定质量控制限度，这就要求对该药物中所有杂质进行分离纯化、结构确证并进行相关测试。

杂质分类有很多种，一般分为有机杂质、无机杂质、溶剂残留等，其中有机杂质主要来源于合成工艺的过程，包括起始原料、催化剂、试剂等，对这部分杂质的纯化可追溯其合成路线才能充分了解引入的杂质情况针对性的提纯；无机杂质一般包括无机盐或金属杂质等，一般按照药典对其杂质进行定量；残留溶剂一般也是合成工艺引入可通过气相色谱检测，经旋蒸、冻干等方式除去。对杂质的定性定量在对指引药品制备工艺的研发和优化具有指导意义，只有在充分了解杂质并对其有效控制，药品质量控制才能有的放矢。

实验部分

1.样品分析

样品主要提纯粗品中含量少的杂质组分，液相检测杂质纯度含量约35%，且极性较小，液相需要90%的甲醇等度才能洗脱下来。

图1  粗品的HPLC分析谱图

2.样品的分离纯化方法

取1g粗品溶于4ml甲醇中，超声直至澄清状态，用注射器将溶解后的样品推进反相柱中。

3.案例小结

根据制备谱图2可以看出，主峰和杂质目标峰不仅基线分离且分离度较高，为了提高效率后续制备可加大上样量至2g。制备后通过HPLC检测，目标组分纯度大于98%（HPLC分析图谱参见图3）。

图2  Flash粗品纯化谱图

图3  制备后HPLC分析谱图

结果与讨论

上述实验的杂质纯化较简单，因为粗品中杂质纯度含量较高且与主峰能达到基线分离方便后续制备提高进样量。但是大部分杂质提纯过程都困难重重，如杂质组分含量太低，分离度太低无法一次提纯到要求的纯度含量等，这种情况下第一步需要先将杂质富集起来，不追求一针提纯的杂质含量纯度，加大上样量力求快速富集，第二步对富集后的杂质精细纯化，将富集后的杂质后处理再优化方法精制提纯。

图4和图5是杂质的制备谱图，样品是某CRO公司提供，需要提纯目标杂质定性但杂质含量较低且分离度不高。三泰科技的应用工程师对杂质进行先富集再精制的路线，成功将杂质含量只有2%的组分提纯到95%以上。

图4  粗品富集杂质制备谱图

图5  富集后杂质精细纯化谱图

关于SepaFlash® C18AQ反相分离柱系列产品

三泰科技推出的SepaFlash® C18AQ反相分离柱系列产品具有多种规格（参见表2）。

表2. SepaFlash® C18AQ反相分离柱参数

（填料:High-efficiency spherical C18(AQ), 20 – 45 μm, 100 Å）