Trypsin蛋⽩酶,质谱级
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HLS TRY001C Trypsin 蛋⽩酶 100μg
HLS HCL001 1mM盐酸溶液 400μl
说明:胰蛋⽩酶特异性⽔解在赖氨酸和精氨酸残留物的碳端的肽键。未修饰的胰蛋⽩酶受制于蛋⽩酶⾃⽔解所产⽣的残余物,影响
HPLC肽段分析,另外,⾃⽔解可以导致假性胰蛋⽩酶的产物,显⽰出胰凝乳蛋⽩酶的特性。华利世质谱级胰蛋⽩酶是修饰猪的胰蛋⽩
酶,通过还原甲基化补偿它阻⽌蛋⽩⽔解消化。质谱级修饰胰蛋⽩酶通过TPCK处理,亲和纯化进⼀步改进,⽣成⾼活性和稳定的分⼦
物理形态:质谱级Trypsin蛋⽩酶是冻⼲粉
分⼦量:23kDa
溶解液(HLS HAc001C):Trypsin蛋⽩酶复溶解缓冲液建议1mM盐酸
储存条件:冻⼲粉末存储在-20℃冰箱,再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签
保质期:24⽉在-20°C
pH 值范围:pH7-9范围有最⼤的活性,在pH4翻转⽆活性
适⽤范围:Trypsin蛋⽩酶特异性⽔解变性后蛋⽩质K和R位,推荐和rLys-C混合使⽤
推荐SOP:通⽤溶液酶解法
Trypsin蛋⽩酶按照 25⾄100:1 蛋⽩和蛋⽩酶的量(w/w)使⽤,37°C恒温过夜13-16⼩时
温馨提⽰:
1.为了保证最⼤活性,使⽤提供的胰蛋⽩酶溶解液溶解质谱级胰蛋⽩酶,使⽤前在30°C保温15分钟
2.尿素的浓度最好⼩于1M
质量控制 |Quality Control
纯度:液相⾊谱280nm检测杂质蛋⽩质峰强度,rLys-C峰强度⼤于99.9%
专⼀性:HSA⼈⾎清⽩蛋⽩样品,ESI-MS/MS质谱分析K和R端的专⼀性⼤于99.8%
活性:13397umg;单位定义:胰蛋⽩酶同酶底物BAEE反应,在25℃需要产⽣每分钟在波长253nm ,每0.001吸收值的差的数量
Maldi TOF质谱检测:纯化后的蛋⽩酶使⽤HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋⽩质峰
LC-MS/MS 质谱分析:使⽤Trypsin酶解HSA(⼈⾎清⽩蛋⽩,纯度99.9%)实验,DTT还原,IAA保护,PH8.0,37℃恒温过夜16⼩时,液质QE
联⽤仪分析,覆盖率86%。