在很长的一段时间里,喹乙醇作为一种增育饲料兽药,受到广大养殖户的欢迎,但是由于后期通过检验,有致癌致畸的风险,所以已经被命令禁止在养殖产业进行使用,但是这并不能妨碍我们去了解这种物质。通过一定的方法和手段,我们就可以对这种历史中有着重要作用的物质做详细的了解了。那么,喹乙醇检测方法和流程是什么?
实验原理:科标生物检测中心参照国标GB/T8381.7-2009饲料中喹乙醇的测定[1] 高效液相色谱法,试样经粉碎后用甲醇溶液提取,固相萃取小柱净化,反相液相色谱柱分离测定,紫外检测器检测,外标法定量分析。
仪器试剂:高效液相色谱仪带紫外检测器,RE-52AA旋转蒸发仪,HH-4数显恒温水浴锅;甲醇为色谱纯试剂,实验用水为超纯水。
试验方法:
1.提取:称取5g饲料(精确到0.1mg)于具塞锥形瓶中,加入5%甲醇提取液,具塞置于摇床中,室温下恒温震荡,震荡速度为110r/min,避光震荡45min。提取液在3500r/min条件下离心10min,过滤,得滤液。
2.净化:SPE小柱活化:临用前分别向SPE小柱中加入2ml甲醇和2ml超纯水,对小柱进行活化;净化:取滤液2ml加入活化好的SPE小柱,分别用2ml0.02mol/L盐酸、0.1mol/L盐酸、5%甲醇溶液淋洗小柱,并将小柱吹干,最后用2ml40%甲醇洗脱。收集洗脱液。
3.色谱条件:
色谱柱:Thermoscientific-C18(250×4.6mm,粒径5μm);
检测波长:260nm;
流动相:甲醇-水(梯度洗脱);
流速:1.0mL/min
进样量:20μL。
检出限:0.1mg/kg
将洗脱液过0.22µm有机相滤膜,滤液上机测定。
结果计算与评价:科标生物检测中心利用外标法计算喹乙醇含量,《中国兽药典》(2005版)明确规定,喹乙醇被禁止用于饲料添加剂。
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