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尿激酶提取方法是什么?

https://www.cphi.cn   2019-10-25 17:30 来源:CPhI制药在线

尿激酶提取工艺为:新鲜尿液--除杂--处理尿液--硅胶吸附--吸附物进行盐析--清洗--洗涤--洗脱--硫酸沉淀--虹吸抽干的粗品。

       尿激酶提取工艺为:

       新鲜尿液--除杂--处理尿液--硅胶吸附--吸附物进行盐析--清洗--洗涤--洗脱--硫酸沉淀--虹吸抽干的粗品

尿激酶提取

       提取的操作步骤有:

       1.收集新鲜的尿液过滤,除去杂物,转入搅拌池中,关上排水阀。

       2.搅拌池中的尿液加入硅胶,匀速且向一个方向搅拌2.5至3小时。(每50公斤加硅胶1公斤,加入的硅胶为中性的,预先处理好的)

       3.搅拌好后打开排水阀,池中的尿液与硅胶一同由排水阀流出,这时预先要在排水阀上安装一个网状的布袋,使废弃的尿液由下水道排出,硅胶则被收集起来。

       4.收集好的硅胶放入层析柱中,先用自来水来清洗,不控制其流速,待其废液的颜色与水的一样清时即可,若清洗许久都不清时可加入少量的氨水来调节。

       5.清洗完毕后,调节层析柱的流速为800ml每分钟,用洗脱水(氨水120ml,尿激酶活性提高剂120g),进行洗脱.(此时要注意加入洗脱水时要确保柱体为一半偏上即可)

       6.待上述液体全部流过后,从新调节层析柱的流速为600ml每分钟,加入解脱水(氯化铵3公斤,尿激酶活性提高剂60g至80g)进行洗脱,大约5至10分钟后,加入氨水7500ml至8000ml,将其洗脱液收集到一容器内。

       7.在上步收集的液体中加入净化的饱和硫酸铵,搅拌均匀后,静置8小时使其沉淀。

       8.将沉淀转入抽滤瓶内,虹吸抽干后,用小铁铲铲起,收集得到其粗品。

       

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