引言

       近日，Blueprint Medicines公司小分子抗肿瘤药物普拉替尼（pralsetinib, BLU-667）扩展适应症以获FDA加速审批，用于治疗携带RET变异的甲状腺癌患者，包括12岁以上需要全身治疗的晚期或转移性RET突变甲状腺髓样癌（MTC）患者，或需要全身治疗且**碘难治性晚期或转移性RET融合阳性甲状腺癌患者。

       普拉替尼（pralsetinib）

       Pralsetinib于今年9月5日由FDA加速批准，用于治疗RET融合阳性的转移性非小细胞肺癌（NSCLC）成人患者，仅次于2020年5月8日在美国获批上市的Selpercatinib (LOXO-292), 成为全球第二款获批上市的RET抑制剂。在国内，Blueprint Medicines的合作伙伴基石药业拥有pralsetinib在大中华区独家开发和商业化授权。2020年9月，基石药业宣布pralsetinib在中国的上市申请已被NMPA受理并纳入优先评审，用于治疗经含铂化疗的RET融合阳性的NSCLC患者，如果获得批准，将是国内首个上市的RET靶向治疗药物。2020年9月30日，在刚获FDA批准之后，普拉替尼胶囊引入海南博鳌乐城，普拉替尼也成为乐城首个当月同步落地的全球新药，为国内非小细胞肺癌患者带来更多临床治疗选择。

       RET突变

       RET（Rearranged during transfection，转染时发生重排）原癌基因最初在1985年通过人类淋巴瘤DNA转染NIH3T3细胞时首次被证实，其定位于10号染色体的长臂上，编码的RET蛋白是一种酪氨酸激酶受体，其在正常的神经元、交感神经和副交感神经节、甲状腺C细胞、肾上腺髓细胞、泌尿生殖道细胞、睾丸生殖细胞都有表达。RET蛋白活化后会激活下游的信号通路（包含RAS、MAPK、ERK、PI3K、AKT等），导致细胞增殖、迁移和分化。

       RET的异常激活主要有三种机制包括框内RET基因融合，RET基因定向突变和RET基因过表达。

       表一 RET基因在各癌种出现频率

       非小细胞肺癌的RET基因融合只占1%-2%的频率，比较常见于从未吸烟、腺癌的年轻患者，而且RET基因与其他驱动基因如EGFR、KRAS、ALK、HER2和BRAF是互相排斥的，即很少同时出现，即RET基因是一个独立的非小细胞肺癌的驱动基因。但是由于非小细胞肺癌患者的基数巨大，因此存在RET基因融合靶点的NSCLC患者并不少见。

       普拉替尼（pralsetinib）合成路线

       US 20170121312 A1

       该路线为原研公司在化合物专利中报道的合成路线。路线以2 ,4-二氯-6-甲基嘧啶1作为起始原料，首先与MeSNa取代得到硫醚中间体2。而后，4-碘-1-甲氧基环己烷甲酸甲酯3在Rieke Zn试剂活化后，经钯催化剂催化反应得到中间体4。接下来，中间体4经mCPBA氧化得到砜基化合物5，经水解，氯化，得到中间体7。而后，中间体7经Buchwald偶联反应得到中间体8。最终，经酯水解、酰胺缩合反应得到目标产物pralsetinib。

       在该路线中，中间体4经LC/MS中的UV峰积分和NMR积分确定为约3:2的异构体混合物，并以混合物的状态直接用于接下来的反应。最后一步，手性胺中间体9经酰胺缩合反应向API结构中引入一个手性中心，得到API的非对映异构体混合物。将该混合物溶解于6mL甲醇中并通过SFC(ChiralPak AD-H 21x250mm，含有于CO2中的0.25％DEA的40％MeOH，2.5mL注入液，70mL/min)纯化。收集六元环顺式的一对非对映异构体（cis-），分别为(1R ,4S)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1-甲氧基-4-(4-甲基-6-((5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)环己烷甲酰胺(10％)，与(1S ,4R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1-甲氧基-4-(4-甲基-6-((5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)环己烷甲酰胺(46％)。

       CN 111362923 A

       国内专利报道了一条pralsetinib的合成路线，该路线以溴基取代物10作为起始原料，经钯催化的Suzuki反应得到中间体12。而后中间体12在酸性条件下脱去缩醛保护，得到酮基中间体13。中间体13在碱与三溴甲烷的作用下得到羧基中间体14。最后经酰胺缩合反应得到目标产物。

       该路线通过酮基一步引入烷氧基与羧酸，省去了羧酸酯脱保护的步骤，但是所用试剂三溴甲烷有较大的刺激性与**。该专利中API的纯化通过硅胶柱层析完成。

       CN 111440151 A

       另一条合成路线中，同样以化合物10作为起始原料。其反应步骤与原研路线相似，只不过通过变更起始原料省去了Buchwald偶联生成C-N键的步骤。API的纯化方式采用硅胶柱层析的方法，得到一对非对映异构体。

       参考文献

       1. US 20170121312 A1

       2. CN 111362923 A

       3. CN 111440151 A