实验室无难题，看液相色谱柱如何四两拨千斤

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实验室无难题，看液相色谱柱如何四两拨千斤

https://www.cphi.cn 2023-04-03 11:18 来源：CPHI制药在线作者：CPHI世界制药原料中国展

在分析化学领域，液相色谱是应用最为广泛的一种分离方法。其原理是将样品溶液与固定于填充床上的流动相进行相对运动，在移动床中各组分的分配比由流动相的种类和流速决定，从而实现混合物中各种组分的高效分离。

在分析化学领域，液相色谱是应用最为广泛的一种分离方法。其原理是将样品溶液与固定于填充床上的流动相进行相对运动，在移动床中各组分的分配比由流动相的种类和流速决定，从而实现混合物中各种组分的高效分离。一般选择液相色谱柱的原则是，分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱；对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱，以改善峰形，延长色谱柱使用寿命等。

色谱方法的分类

液相色谱分离方法大致可以分为正相色谱、反相色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱、体积排除色谱、亲和色谱以及手性色谱。在高效液相色谱法中，目前应用得最广泛的是正相色谱和反相色谱，其中反相色谱又是重中之中。

色谱分离基本原理

正相色谱的分离原理

根据溶质极性的不同而产生的溶质在吸附剂上吸附性强弱的差异而分离。

反相色谱的分离原理

根据因溶质疏水性的不同而产生的溶质在流动相与固定相之间分配系数的差异而分离。

范德姆特方程

范德姆特方程（Van Deemter equation）在色谱学中是综合考虑了分离过程中引起峰展宽的物理因素、动力学因素和热力学因素后得到的单位柱长的总峰展宽与流动相流速的关系式。

液相色谱柱的结构

液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝（封头）与柱填料等组成。

柱管

多用不锈钢制成，如果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。

压帽

即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。

密封环

位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。

液相色谱柱规格

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类

常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm

窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm

毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm

半制备柱，内径＞5mm

实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm

生产制备柱内径可达几十厘米

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