脂肪酶活力测定的方法是什么？

https://www.cphi.cn 2019-10-23 15:38 来源：CPhI制药在线

脂肪酶活力测定是常见的一种测试步骤，测试时用到的试剂与器材有：1、聚乙烯醇(P. V. P.)橄榄油乳化液：称取40克聚乙烯醇，加蒸馏水约1000毫升，在小火上加热，并不停搅拌，至聚乙烯醇全部溶解，冷却后定容至1000毫升。

脂肪酶活力测定是常见的一种测试步骤，测试时用到的试剂与器材有：

脂肪酶活力测定

1、聚乙烯醇(P. V. P.)橄榄油乳化液：称取40克聚乙烯醇，加蒸馏水约1000毫升，在小火上加热，并不停搅拌，至聚乙烯醇全部溶解，冷却后定容至1000毫升。用双层纱布过滤，滤液备用。取4％聚乙烯醇溶液150毫升，加50毫升橄榄油，用高速组织捣碎机搅动6分钟，即成乳白色聚乙烯醇橄榄油乳化液，保存于低温下（4℃）备用。

2、0.025M磷酸缓冲液（pH7.5）。0.025M磷酸氢二钠溶液的配置：取Na2HPO4·2H2O 4.45g溶于1L蒸馏水中，0.025M磷酸二氢钠溶液的配置：取NaH2PO4·H2O 3.45g（或NaH2PO4·2H2O 3.90g）溶于1L蒸馏水中。将0.025M磷酸氢二钠84ml与0.025M磷酸二氢钠16ml混合，即为0.025M磷酸缓冲液。

3、0.05N氢氧化钠标准溶液

4、1％酚酞指示剂：取1g酚酞溶于100ml 70％乙醇溶剂中。

5、95％乙醇材料：鱼、虾、贝的肝胰脏、胃、肠标本。器材：匀浆器、离心机、恒温水浴。高速组织捣碎机、酸式滴定管、滴定管架、镊子、剪子、锥形瓶、移液管、烧杯。

在做实验时需要重视的注意事项有：

1、使用聚乙烯醇的聚合度为1000－1750，如聚合度低，乳化效果差。橄榄油乳化液在冰箱中保存三天左右仍能保持稳定。

2、反应终了加乙醇可停止酶作用和溶解脂肪酸，以利滴定，乙醇用量以不低于总容量60%为宜。

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