近日，Seattle Genetics公司宣布，FDA批准其口服酪氨酸激酶抑制剂Tucatinib（Tukysa）与曲妥珠单抗和卡培他滨联合，用于治疗晚期不能手术切除或转移性HER2阳性乳腺癌成年患者，包括先前已经接受过至少一次抗HER2疗法的脑转移患者。虽然目前全球疫情不容乐观，但FDA与新加坡卫生科学局（HSA）和瑞士药检局（SMC，瑞士）合作等机构通力合作，快速推进对审查，使得Tucatinib+曲妥珠单抗+卡培他滨的联合用药早于FDA目标日期4个月上市。

       2018年2月，Seattle Genetics公司以每股10美元总共约6.14亿美元的价格收购Cascadian Therapeutics公司，将包括该公司最具潜力的在研口服小分子HER2抑制剂Tucatinib在内的研发管线悉数收入囊中。早在2017年6月，Tucatinib便获得了FDA认定成为治疗具有脑转移乳腺癌的孤儿药。

       Tucatinib具有良好的血脑屏障透过性。根据统计，HER2阳性乳腺癌约占乳腺癌的20%，超过25%的转移性HER2阳性乳腺癌发生脑转移。但遗憾的是，HER2阳性乳腺癌脑转移患者的临床治疗需求一直未能满足。此次Tucatinib的获批上市为这部分患者提供了更多可供选择的靶向治疗方案，对HER2阳性乳腺癌脑转移的治疗具有重要的意义。

       这次获批主要是基于随机双盲安慰剂对照的全球关键性研究HER2CLIMB。该研究共招募了612例HER2阳性不可切除或转移性乳腺癌患者，既往曾接受过曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和T-DM1治疗。其中48%患者有脑转移。2:1随机分入Tucatinib+曲妥珠单抗+卡培他滨和安慰剂+曲妥珠单抗+卡培他滨组，主要研究终点是总人群的无进展生存（PFS），次要终点包括总人群的总生存（OS）、脑转移患者的PFS和基线有可测量病灶患者的客观缓解率（ORR）。

       实验结果充分表明，Tucatinib+曲妥珠单抗+卡培他滨治对晚期HER2阳性乳腺癌具有良好的治疗作用，可明显改善患者的PFS和OS，尤其重要的是对脑转移也显示了很好的疗效。而且由于其选择性的抑制HER2，副作用相对更小，患者可良好耐受，与曲妥珠单抗和T-DM1均可联合应用，**并无显著增加。

       腹泻是Tucatinib常见副作用，但由于Tucatinib更多选择性的作用于HER2，较少作用于EGFR和HER1，因此Tucatinib的腹泻发生率明显少于其他HER2抑制剂，如奈拉帕尼和拉帕替尼。

       SVB Leerink分析师Andrew Berens预计，到2030年，Tukysa的峰值销售额将达到12亿美元。

       Tucatinib合成路线

       WO2013142875

       图1 Tucatinib原研合成路线

       原研合成路线如图1所示，该路线由Array BioPharma Inc.开发，能够以毫克规模制备tucatinib (1)。该路线以2-氨基-5-硝基苄腈（2）作为起始物料，与DMF-DMA在100oC高温下反应生成亚胺中间体3，分离产率为87％。而后，以Pd/C作为催化剂，H2氢化还原硝基，反应时间10小时，能够以90%的收率得到苯胺化合物4。中间体4在-10°C与2-氨基-2-甲基-1-丙醇和N,N'-硫羰基二咪唑(TCDI)反应16小时，粗产品通过柱色谱法纯化，以34％的产率获得了硫脲化合物5。而后，以醋酸为溶剂，经Dimroth重排反应构建喹唑啉中间体7，分离产率60％。最后，中间体7的硫脲侧链在室温条件下环化成噁唑啉环，粗产品经柱色谱法纯化后得到毫克级目标产物tucatinib (1)，收率未报道。

       该路线涉及多步高温反应，且纯化过程基本靠柱色谱层析完成，仅适用于实验室内毫克级制备以提供药学研究所需API，原研公司并未进一步披露可实现大规模制备的合成工艺路线。

       CN109942576A

       国内专利CN109942576A报道了tucatinib以及中间体6，15，17合成路线。

       中间体6的制备

       图2 中间体6的合成路线

       首先，以2-甲基-4-硝基苯酚(8)与4-氯-2-硝基吡啶式(9)为起始物料，以DIPEA为碱，高温条件下反应48h，制备得到中间体10，分离收率64%。而后，在乙醇溶剂中，10与DMF-DMA在75℃下反应得到甲脒中间11，反应完成不经后处理，两步叠缩，直接加入盐酸羟胺在50℃条件下反应，反应过程中有固体析出，经过滤得到固体粉末状羟胺中间体12，两步收率81%。接下来，中间体12与三氟乙酸酐反应，环化得到三唑并吡啶中间体13，中间体13在甲醇中重结晶纯化，分离收率68%。最后，以Pd/C作为催化剂，在THF中40℃反应15h，H2还原氢化13。反应完成后，过滤得到滤液，减压蒸馏除去溶剂后，在甲醇与水的混合溶剂中重结晶，得到类白色固体6，分离收率93%，纯度99.1%。

       根据报道，该工艺路线可以实现制备100g规模的中间体6。但是，该路线第一步合成中间体10的反应温度太高，条件苛刻，且收率只有64%。因此还有进一步优化的空间。

       中间体15的制备

       图3 中间体15的合成路线

       甲脒中间体3与中间体6在乙酸溶剂中经Dimroth重排反应构建喹唑啉中间体14。反应完成后，减压蒸馏除去溶剂，并加入水，析出固体产物，分离收率83%。HPLC检测得到产物纯度为99.47%。而后，以Pd/C作为催化剂，在H2氛围下还原硝基，得到中间体15，分离收率为92%，HPLC纯度为99.90%。

       中间体17的制备

       图4 中间体17与API的合成

       首先，以2-氨基-2-甲基-1-丙醇和TCDI在二氯甲烷溶液中环化，室温反应17h，以83％分离收率得到中间体4,4-二甲基恶唑烷-2-硫酮(16)。然后，中间体16与三氟甲磺酸甲酯反应，以81％的分离产率得到化合物17。中间体16相对稳定，可以在4°C下保存几周。而中间体17的稳定性较差，室温下保存一周后分解，在-18°C的氩气氛围下保存两周而不会变质，因此在生产后最好立即用于下一步。

       最后，中间体17与中间体15在125℃下，以碳酸铯为碱，反应20小时得到tucatinib。得到的粗产品在乙酸乙酯与正庚烷的混合溶剂中重结晶，最终分离收率为76%，HPLC纯度为99.9%。该API的制备步骤中会产生具有异味的甲硫醇，需要额外注意废气的收集步骤。

       该合成路线最终能够实现克级API的制备。由于路线中涉及到多个高温反应和一些有毒副产物的生成，因此该路线还有继续改进的空间。

       参考文献

       1. WO2013142875

       2. CN109942576A

       3. Synthesis 2019; 51(13): 2660-2664.