c-Met/HGF靶点介绍

       原癌基因Met编码的c-Met（cellular-mesenchymal epithelial transition factor）是一种具有高度结合性的受体酪氨酸激酶，属于RON亚族，是肝细胞生长因子(HGF)唯一已知的受体。在占据肺癌80%-85%的NSCLC中，3%-5%的患者会出现MET基因扩增或外显子14发生突变。

       约10%~20%的EGFR抑制剂耐药表现为MET扩增突变，对第三代EGFR抑制剂（比如奥希替尼）耐药的患者中MET异常的比例更是高达25%；约10%的ALK抑制剂耐药也会表现为MET扩增。

       整体来说，肺癌患者对于一款疗效更好的MET抑制剂的需求非常庞大，且远未能得到满足。2020年，两款重磅MET抑制剂问世，奏响MET抑制剂研发界期待多年的凯歌。2021年，多款我国自主研发的MET抑制剂新药紧随其后闪亮登场，为患者们送来了触手可及的新希望。下面分别对已上市的两款MET抑制剂以及两款国内自主研发的MET抑制剂进行简介。

       Capmatinib

       2020年5月，FDA批准诺华公司c-Met抑制剂Tabrecta (capmatinib)上市，用于治疗局部晚期或转移性MET外显子14跳跃（METEX 14）突变的NSCLC患者，包括一线治疗初治患者和经治患者。Capmatinib是第一个被FDA批准专门针对METex14突变转移性NSCLC的疗法。METex14突变晚期NSCLC是一种预后极差的肺癌，尚无明确的治疗方案。

       值得一提的是，在Capmatinib的GEOMETRY mono-1临床研究中，纳入的13名脑转移的MET突变患者，12例（92.3%）颅内疾病控制，其中4例患者脑部所有病灶均消失。该研究表明，患者的颅内缓解与全身缓解一样迅速。

       Capmatinib合成路线

       图一 Capmatinib合成路线

       专利WO 2009143211 A2报道了原研合成路线，该合成路线以溴取代苯甲酸1为起始化合物，经酰氯化、成酰胺两步反应得到酰胺中间体3，而后与甲基格氏试剂反应得到苯乙酮中间体4，中间体4在HBr-DMSO氧化体系下生成苯乙酮醛中间体5。中间体5与原甲酸三乙酯缩合得到中间体6，而后在碱性条件下关环得到三嗪中间体7。三嗪中间体与中间体8关环得到咪唑并三嗪杂环9。在钯催化剂催化下氰基取代，而后氰基水解得到羧酸中间体11。最终，在缩合剂的存在下与甲胺成酰胺得到目标产物。

       该反应路线中涉及到多个超过100℃的反应步骤，条件较为苛刻，仍有较大的优化空间。

       Tepotinib

       特 普 替 尼（Tepmetko®，Tepotinib）是全球首 个获批用于治疗非小细胞肺癌的MET抑制剂药物。2020年3月25日，日本厚生劳动省批准Tepotinib在日本上市，用于治疗MET 14外显子跳跃突变的非小细胞肺癌患者。在此前，Tepotinib曾被FDA授予突破性疗法称号，并获日本厚生劳动省授予的创新药物资格与孤儿药称号。

       2021年02月03日，德国默克（Merck KGaA）旗下EMD Serono宣布，美国FDA已加速批准口服MET抑制剂Tepmetko（tepotinib）上市，用于治疗携带MET外显子14（METex14）跳跃变异的转移性非小细胞肺癌（NSCLC）成人患者。

       Tepotinib合成路线

       路线①

       图二 Tepotinib合成路线1

       专利WO 2009006959 A1中报道了一条Tepotinib的合成路线，该路线首先通过Mitsunobu醚化反应得到醚基中间体14，而后通过DIBAH还原得到羟基中间体15，最终通过与中间体16的Mitsunobu胺基取代得到最终产物。

       路线②

       图三 Tepotinib合成路线2

       原研团队在Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters杂志文章中报道了另外一条合成路线，该路线首先通过亲核取代反应得到中间体18，然后通过钯催化反应得到硼酸酯中间体19，并在过硼酸钠的参与下转化为羟基。而后，经Mitsunobu醚化反应得到中间体21。最终，在甲醛溶液的参与下得到目标产物。

       沃利替尼 (Savolitinib)

       沃利替尼是和黄医药和阿斯利康共同合作开发的高选择性ATP竞争性c-MET抑制剂，主要作用于MET外显子14突变。作为一款广谱抗癌药，沃利替尼主要适应症有前列腺癌、肺癌、胃癌、肾癌等。沃利替尼对c-MET和p-MET的IC50分别为5nM和3nM，除了高效抑制c-MET外，沃利替尼还解决了其他选择性c-MET抑制剂存在的肾**问题，是一种高选择性的口服c-MET抑制剂。

       2020年7月28日，和黄医药宣布中国国家药品监督管理局将沃利替尼(savolitinib)用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的新药上市申请纳入优先审评。这是沃利替尼在全球范围内的首 个新药上市申请，也是中国首 个选择性MET抑制剂新药上市申请。

       Savolitinib合成路线

       合成路线①

       图四 WO 2011079804路线

       专利WO2011079804中首先披露了API合成路线。该路线以化合物2二溴吡嗪为起始原料，以DIPEA作为碱，经亲核取代反应，得到中间体3。而后，酸性条件下关环得到中间体4。经Suzuki-Miyaura偶联反应得到外消旋中间6。最后，经手性高效液相制备，得到目标产物。

       作为实验室探索阶段的合成方法，上述路线能够顺利的制备目标产物。但是，该路线的缺点也较为明显，最后一步通过手性HPLC方法分离得到光学纯产物，不适用于放大生成。并且该手性分离步骤过于靠后，最后一步收率不会超过50%，造成物料的极大浪费。另外，由于中间体理化性质的原因，该路线缺少容易质控的节点，放大生产后质量难以控制。因此，原研公司的科研人员对该路线进行了革新。

       合成路线②

       图五 WO 2020053198路线

       最近，AstraZeneca报导了一条适用于工业化大生产的新路线（WO 2020053198）。该路线的亮点在于，在第一步中，以酮中间体7为底物，通过转氨酶ATA-436酶催化的方法，以异丙基胺作为氨基供体，经绿色化学途径引入手性胺中心，得到高光学纯度的手性胺中间体8。该"化学-酶"法路线克服了原路线在最后一步引入手性中心的缺点。并且路线中的中间体可经结晶纯化，简化了质量控制的难度。该路线所用工程酶目前已商业化，由Codexis公司购得。

       Bozitinib

       2月22日，中国国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）最新公示，由北京浦润奥申请的1.1类新药伯瑞替尼拟纳入突破性治疗品种，拟用于c-MET外显子14突变的非小细胞肺癌（NSCLC）。

       伯瑞替尼（bozitinib）是针对c-MET的单靶点小分子靶向药物，通过与ATP竞争位点结合，阻断酪氨酸激酶磷酸化发挥抑制c-MET激酶的作用。目前，该产品正在针对多个肿瘤（如NSCLC）中开展临床试验。其中，冠科美博（Apollomics）在美国开展相关临床试验，北京浦润奥生物科技有限公司在中国拥有该产品的开发权，目前已在中国登记开展了4项临床试验。

       Bozitinib合成路线

       图六 Bozitinib合成路线

       专利CN 103122000 B报道了Bozitinib的原研合成路线，该路线采用汇聚式合成路线设计，首先分别合成了关键中间体33和41，并最终通过关环反应得到Bozitinib。

       结语

       2020上半年获批的两个c-Met抑制剂对该领域药物研发具有里程碑意义。高选择性靶向药物的开发，也进一步证明了该靶点的价值。目前国内尚无该靶点药物上市，c-Met抑制剂的快速开对于药企具有较高商业价值，对于患者来说将极大改善疾病的临床治疗现状。

       参考文献

       1. WO 2009143211 A2

       2. WO 2009006959 A1

       3. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25, 1597-1602

       4. WO2011079804

       5. WO 2020053198

       6. CN 103122000 B