近日，全国团体信息平台正式发布了《注射剂包装密封性检查微生物挑战：浸入式暴露试验要求》（T/ZJPA 002-2023）团体标准，该标准由浙江省医药行业协会组织起草，并将于2024年02月01日起正式实施。这一团体标准的制定，填补了国内在注射剂包装密封性检查微生物挑战：浸入式暴露试验要求领域的空白。标准规定了使用浸入式微生物暴露试验法进行非透气性注射剂包装系统密封性检查或验证时，应满足的通用要求，并为相关操作提供了全面的指南。

       该标准的出台，不仅有助于提升国内注射剂包装密封性的质量标准，更进一步确保了药品的安全性和有效性。

       一、我国包材密封性检测法规和指导原则

       包装系统密封性（package integrity），又称容器密封完整性（container-closure integrity），是指包装系统防止内容物损失、微生物侵入以及气体（氧气、空气、水蒸气等）或其他物质进入，保证药品持续符合安全与质量要求的能力。包装密封性贯穿药品整个生命周期，从药品包装在生产线制备开始，到灌装密封、灭菌、储存、运输、使用，都需要有合适的保障，注射剂作为高风险无菌制剂，其质量及安全要求极高，作为与注射剂药品直接接触的材料和容器，包装系统的主要功能是为药品提供充分保护，我们来看下国内针对包装密封性验证都有哪些法规和指导原则，具体如下表：

       二、《注射剂包装密封性检查微生物挑战：浸入式暴露试验要求》标准信息

       三、注射剂包装密封性检查-微生物挑战合规的关注点

       国内尚未出台针对注射剂包装密封性检查微生物挑战有细化的规定，且目前也无相关法规对行业进行更具体的指导，如何合法、合规一直是业界高度关注的，本文结合《注射剂包装密封性检查微生物挑战：浸入式暴露试验要求》，梳理了注射剂包装密封性检查微生物挑战合规的关注点，如有遗漏，欢迎大家留言补充，主要技术内容和适用范围如下：

       (1) 主要技术内容：本标准规定了使用浸入式微生物暴露试验法进行非透气性注射剂包装系统密封性检查或验证时宜满足的通用要求，并为其提供指南。

       (2) 适用范围：本标准适用于注射剂及部分无菌制剂（如滴眼剂、烧伤制剂等）非透气性包装容器的密封性及密封工艺的研究和验证，以及微生物侵入的风险评估；其中给出的原则及要求可供药品生产企业、检验机构及科研单位参考；适用于密封性检测方法的灵敏度对比研究。本标准不适用于注射剂最终产品的常规放行检查、在线监测及在线检测。

       (3) 标准购买信息：目前该团体标准文本需要查看原文可到全国团体信息平台https://www.ttbz.org.cn。

       (4) 浸入式微生物暴露试验法原理

       浸入式暴露试验是一种评估注射剂包装容器密封性的重要方法。通过将灌装有适当培养基的注射剂包装容器浸入挑战微生物悬液中，使微生物有机会沿着容器潜在的漏路进入容器内的培养基。随后，将容器移至适当的培养条件下，并在该条件下进行一定时长的培养。培养结束后，观察容器内部的培养基是否出现微生物生长，从而判断该包装容器是否存在可允许微生物侵入的漏路，即包装完整性。

       这种试验方法不仅对包装容器的密封性进行了全面的评估，而且通过模拟实际应用场景的条件，为生产商提供了更具有实际意义的测试结果。这对于确保药品在整个生命周期中的质量和安全性至关重要，有助于提升公众对药品的信任度。

       (5) 浸入式微生物暴露试验法样品试验流程

       本文结合标准中示例，梳理了浸入式微生物暴露试验法样品试验流程。

       1. 人工打孔样品制备：

       a）将待测样品（方法灵敏度验证实验中为人工打孔样品）浸入装有适量制备悬液的挑战容器中；浸没暴露时长宜基于实际使用条件进行风险评估确定，或者通过验证研究确定。注：样品浸没时可能会发生上浮或移动，因此宜考虑设置固定装置。

       b）若待测样品体积过大导致无法完全浸没，也可将挑战悬液直接加至样品表面，但在采用该方式前需先证明其合理性。

       c）为保护设备及试验人员，在挑战试验结束后但未开始样品培养前，宜用无菌水清洗样品外壁残留的挑战悬液，并宜将测试样品及对照样品放入保护容器或无菌袋中，防止挑战微生物及培养基在培养过程中污染培养箱。

       2. 放入培养箱培养：

       将测试样品及对照样品放入培养箱并在适宜条件下进行培养，取阴性对照进行促生长试验。

       3. 观察样品微生物生长结果

       在培养结束后，将适量挑战微生物（接种量宜为10-100 CFU）接种至阴性对照样品中并进行培养（即促生长试验），以确认培养体系的促微生物生长能力。

       检查样品内的培养基是否出现浑浊。若试验样品本身不易透光，或者因体积过大导致不易观察，可将测试样品内的部分或全部培养基转移至独立的透明容器中进行检查。

       注：试验结束后，应通过适用的灭活方法（如热力、化学或辐照杀菌）对剩余挑战悬液进行处理，防止对实验环境造成污染。

       4. 结果分析

       灵敏度验证试验结果必须满足"可接受标准及结果判定"中给出的要求。即：

       a）暴露试验结束后，挑战悬液的最低微生物浓度应满足预定的目标浓度（如10-CFU/mL)。

       b）阴性对照必须未出现微生物生长。

       c）阳性对照必须出现微生物生长。

       d）若测试样品出现微生物生长，那么宜在后续调查中采用适当的方法进行鉴定，确定其是否为挑战微生物。

       e）促微生物试验必须出现挑战微生物生长。

       f）若测试样品无微生物生长，样品密封性完整。

       如果试验增设了泄漏缺陷阳性对照样品和浸入悬液挑战的阴性对照样品，那么前者在培养后必须出现微生物生长，后者在培养后应无微生物生长。

       参考文献

       [1] www.ttbz.org.cn、浙江省医药行业协会网页等