https://www.cphi.cn 2023-05-12 16:22 来源：智药公会 作者：老陈
“培养基是指液体、半固体或固体形式的、含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖（含或不含某类微生物的抑菌剂）、鉴定或保持其活力的物质”。
“培养基的管理应当至少符合以下要求：培养基应当从可靠的供应商处采购，必要时应当对供应商进行评估。应当有接收培养基的记录，必要时，应当在培养基的容器上标注接收日期。应当按照相关规定或使用说明配制、贮存和使用培养基。已配制的培养基应当标注配制批号、配制日期和配制人员姓名，并有配制（包括灭菌）记录。不稳定的培养基应当标注有效期及特殊贮存条件。配制的培养基应当进行适用性检查，并有相关记录。应当有培养基使用记录”。
培养基直接影响到微生物检测结果的准确性，药品生产企业质量控制部门要做好培养基管理，需要从五方面考虑：供应商选择与管理；培养基的采购、接收和储存管理；培养基的使用管理；废弃物管理；相关的文件化信息管理。
首先，供应商选择与管理。药品生产企业质量控制实验室所用的培养基应当从已批准的合格供应商处购买。药品生产企业要对培养基的供应商进行选择和管理，确保供应商提供的培养基能持续满足检验工作需要。特别是，检测方法发生变更时，需要对培养基进行适用性检查。培养基的质量由基础成分的质量、制备过程的控制、微生物污染的消除及包装和储存条件等因素所决定。供应商或制备者应确保培养基的理化特性满足相关标准的要求，以下特性的质量评估结果应符合相应的规定：分装的量和（或）厚度；外观，色泽和均一性；琼脂凝胶的硬度；水分含量；20 ℃～25 ℃的 pH；缓冲能力；微生物污染。培养基的各种成分、添加剂或选择剂应进行适当的质量评价。国家标准中提到的培养基通常可以直接使用。但因其中一些培养基成分(见附录C)质量不稳定，可允许对其用量进行适当的调整，根据营养需要改变蛋白胨、牛肉浸出物、酵母浸出物的用量；根据所需凝胶作用的效果改变琼脂的用量；根据缓冲要求决定缓冲物质用量根据选择性要求决定胆盐、胆汁抽提物和脱氧胆酸盐、抗菌染料的用量；根据抗生素的效价决定其用量。
其次，培养基的采购、接收和储存的管理。培养基的采购既要考虑采购成本，又要考虑使用量，还需要考虑保存期限。药品生产企业为了节省成本或者出于其他目的，一次采购大量的培养基，有的培养基还未开启，就已经过了保质期。培养基的采购需要优先考虑使用量和保质期，采购时要采购最新生产的产品。第一、采购时，药品生产企业质量控制实验室要求培养基生产企业提供培养基或试剂的各种成分、添加成分名称及产品编号、批号、最终pH、储存信息和有效期、保准要求及质控报告、必要的安全和（或）危害数据。第二、验收时，药品生产企业质量控制实验室，除了验收包装完整性和产品合格证明等信息之外，要特别关注保质期和有效期。如果所采购的培养基已过半数保质期，坚决予以拒收。接收时，要结合采购计划和送货单，进行确认产品名称、供应商以及数量。如果不是采购计划所列的产品或者不是合格供应商提供的产品，予以拒收并上报领导，如果数量不对，上报领导和反馈给采购，并按实际数量验收。第三、储存时，药品生产企业质量控制实验室要严格按照标签或者说明书提供的储藏方法进行储藏，并做好《培养基验收入库记录》。
再次，培养基的使用管理。第一、培养基的领用，要遵循先进先出原则和先到期先出的原则领用。第二、培养基的使用，要按照相关的操作规程进行使用。对于使用自制的培养基来说，正确制备培养基是微生物检验的最基础步骤之一，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。对于使用商品化脱水合成培养基来说，应严格按照厂商提供的使用说明配制。实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录培养基名称和类型及试剂级别、各个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积（分装体积）、无菌措施（包括实施的方式、温度及时间）、配置日期、人员等，以便可追溯。
琼脂培养基的融化，将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高压锅中的层流蒸汽）使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重新加热时间，融化后避免过度加热。融化后应短暂置于室温中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。融化后的培养基放入47℃～50℃的恒温水浴锅中冷却保温(可根据实际培养基凝固温度适当提高水浴锅温度)，直至使用，培养基达到47℃～50℃的时间与培养基的品种、体积、数量有关。融化后的培养基应尽快使，放置时间一般不应超过4 h。未用完的培养基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培养基尤应注意，融化后保温时间应尽量缩短，如有特定要求可参考指定的标准。倾注到样品中的培养基温度应控制在约45℃左右。
必要时，将培养基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热15 min；加热时松开容器的盖子；加热后盖紧，并迅速冷却至使用温度（如FT培养基），以对培养基的脱氧。
添加成分的加入，对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃～50℃时再加入。无菌的添加成分在加入前应先放置到室温，避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。将加入添加成分的培养基缓慢充分混匀，尽快分装到待用的容器中。
平板的制备和储存，倾注融化的培养基到平皿中，使之在平皿中形成厚度至少为3 mm（直径90 mm的平皿，通常要加入18 mL～20 mL琼脂培养基）。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存，或者培养时间超过48 h或培养温度高于40 ℃，则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于暗处和（或）5 ℃±3 ℃冰箱的密封袋中，以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好标记，标记的内容包括名称、制备日期和（或）有效期。也可使用适宜的培养基编码系统进行标记。将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延长储存期限。为了避免冷凝水的产生，平板应冷却后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。对于采用表面接种形式培养的固体培养基，应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿盖，将平板倒扣于烘箱或培养箱中（温度设为25 ℃～50 ℃）；或放在有对流的无菌净化台中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
从次，废弃物管理。所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式，并且要符合相关法律法规的规定。
最后，相关的文件化信息。培养基采购、接收、储存、领用（发放）和使用的管理制度。合格供应商名单；请购单；培养基验收入库记录；培养基出库记录；培养基使用台账；配制记录、灭菌记录和使用记录；必要时，废弃物处置记录；必要时，发票。
参考文件
1、食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求
2、药品生产质量管理规范（2010年修订）
作者简介
老陈，质量管理专家，从事食品与制药行业质量管理和质量控制相关工作近二十年，历任QA主管、质量部长、质量经理和生产厂长等职。在国内著名的跨国明胶企业负责质量和食品安全管理体系管理工作。
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